PROBLEMAS TEMAS 4-5

1.- En una electroforesis de alto voltaje en papel a pH 4,0 ¿qué aminoácidos de la relación siguiente migrarán hacia el cátodo y cuáles hacia el ánodo, cuyos pK vienen expresados entre paréntesis?.
  Gly (2,35; 9,78), Cys (1,96; 8,18; 10,28), Asp (2,09; 3,87; 9,82), Lys (2,18;8,95; 10,53) e His (1,77; 6,10; 9,18).

2.- Calcúlese el punto isoeléctrico de la glicocola a partir de los datos siguientes, obtenidos mediante una electroforesis de alto voltaje en papel.
    pH ..................    2,0          3,0             4,0                5,0            7,0           8,0            9,0         10,0
    distancia (cm)..   3,3          2,5             1,7                0,8            -0,7         -1,8          -3,3          -3,4

3.-  Se ha determinado la movilidad relativa en electroforesis en gel de poliacrilamida al 7,5% en presencia de SDS de varias proteínas de peso molecular conocido, obteniéndose los valores:

       Proteínas                                            Peso molecular            Movilidad

       Albúmina de suero...........................        68000                           0,18
       Catalasa...........................................        60000                           0,22
       Glutámico deshidrogenasas............        53000                           0,29
       Gliceraldehído-2-P-deshidrogenasa...    36000                            0,40
       Tripsina...............................................    23300                            0,60
       Mioglobina..........................................    17200                            0,74

Calcúlese el peso molecular de las subunidades de la enzima láctico deshidrogenasa de un insecto si su movilidad electroforética en las mismas condiciones es de 0,455.

4.- La electroforesis de una enzima a la que previamente se ha tratado con SDS y beta-mercaptoetanol, en gel de poliacrilamida con SDS, da 2 bandas con una movilidad relativa de 0,51 y 0,56. La masa molecular de la enzima nativa, determinada mediante Sephadex G-200 y ultracentrifugación, es de 130000. Indique la estructura cuaternaria de la enzima y la masa molecuar de sus subunidades. La movilidad relativa de proteínas patrón en las mismas condiciones es:
                                           Mioglobina      Tripsina      G3PDH      Albúmina
Masa molecular                  17800               23600         36000            43500
Movilidad                              0,75                  0,60            0,40               0,16

5.- La migración de RNA en geles de poliacrilamida se ha comprobado que es inversamente proporcional a su masa molecular, lo que se ha utilizado para el cálculo de ésta. La representación del logaritmo de la masa molecular frente a la distancia migrada da una línea recta para un intervalo adecuado de tamaños. Se ha realizado la electroforesis de RNA del fago T5 de E. coli, en un gel de poliacrilamida del 10%, empleando como patrones RNAs de masa conocidad y obteniendo los siguientes resultados:
Distancia (cm)                           8                            6                        1,8
Masa molecular                   26000                     38000                  85000
Calcule la masa molecular de los dos tipos de RNA del fago, sabiendo que migran 4,3 y 2,4 cm en las mismas condiciones que los patrones anteriores.