PROBLEMAS TEMA 2

 
1.-  Explique qué es eso de Svedberg. ¿Qué propiedades de una partícula afectan a su valor de s?. 

2.- Una centrífuga tiene un rotor cuyo radio es 10 cm. Cuando el rotor gira a 1.000 rpm. Calcule la fuerza centrífuga desarrollada, expresada respecto a la aceleración gravitatoria (g). Compare esa fuerza con la que se daría en un rotor con radio 20 cm girando a la misma velocidad. 

<>3.- Un rotor de centrífuga gira a 2400 rpm. Calcule la intensidad del campo centrífugo:
En un punto del rotor situado a 10 cm del eje de rotación. En un punto del rotor situado a 20 cm del eje de rotación. En el eje de rotación.

4.- En un experimento de velocidad de sedimentación se toma una disolución de cierta proteína y se centrifuga a 52.000 rpm durante dos horas. A distintos tiempos se obtienen fotografías con óptica de schlieren, se miden distancias sobre las placas y, realizando las oportunas correcciones, se obtienen los siguientes datos:

Tiempo (min).....................................................       20       40        60        80        100

Distancia  del máximo al eje de giro (cm).......        6,38     6,51     6,63     6,77     6,90

Calcúlese el coeficiente de sedimentación.


5.-¿Qué tipo de centrifugación debe usarse para separar lipoproteínas (d= 0,91 g/ml) y de lisozima (d= 1,39 g/ml)?. 


6.-Se necesita alcanzar 20.000 x g para sedimentar una determinada fracción subcelular. ¿Qué tipo de centrífuga utilizaría?. Si sólo dispone de un rotor para tubos de 50 ml, con radio de 8 cm, ¿a qué velocidad (rpm) debe ajustarse la centrífuga?.


7.- ¿Cuáles son las diferencias entre la centrifugación zonal y la isopícnica?.


8.- En los estudios de sedimentación y difusión de la L-aspartato-β-descarboxilasa de Pseudomonas dacunhae, se han obtenido los siguientes resultados corregidos para agua a 20ºC:

            s = 20,7 S   y   D = 2,26 x 10-7  cm2.s-1

El volumen específico parcial de la L-aspartato-β-descarboxilasa es 0,72 cm3.g-1. Determínese su peso molecular.

 

9.- En los estudios de sedimentación para determinar el peso molecular de una proteína se han obtenido los siguientes valores:

proteína ( mg.ml-1 )................            3,0       5,0       6,0       7,5       11,0

s20,w (S) ...................................          15,9     15,6     15,4     15,25   14,7

Suponiendo  un volumen específico parcial de 0,72 ml.g-1, determinese el peso molecular de dicha proteína sabiendo que el coeficiente de sedimentación varía con la concentración de proteína según se indica en la siguiente tabla:

proteína ( mg.ml-1 )................            4,0       5,0       7,0       10,0

D20,w (107) cm2.s-1 ..................           1,7       1,66     1,6       1,5

 

10.-Una enzima cuyo coeficiente de sedimentación es 9,45 S, en ciertas condiciones eleva su coeficiente de sedimentación a 14,15 S. Determínese el grado de polimerización.

 

11.- Para calcular el peso molecular de un factor proteico del crecimiento del nervio, se ha utilizado la técnica de equilibrio de sedimentación, centrifugando a 11.017 rpm y 16ºC. En función de la distancia al eje de giro se han medido los siguientes valores:

            x (cm).....................                6,91     6,96     7,00     7,05

            f(c)  ........................                1,22     2,85     4,95     11,02

Determínese el peso molecular del factor proteico, si el término de flotación es 0,296.

12.- Los valores del contenido en (G-C) para una serie de DNA calculado a partir de su densidad de flotación se recogen en la tabla. Determínese el contenido en (G-C) de un DNA cuya densidad de flotación es 1,699 y la densidad de flotación de un DNA cuya composición de bases es del 36 por 100 en (G-C) sin hacer uso de la ecuación de Rolfe y Meselson.

            θ                        1,68               1,688               1,6951             1,7018

            % (G-C)         27                    35                    42                    48


13.-Una de las aplicaciones de la centrifugación isopícnica es el cálculo de la composición de bases del DNA. Se ha encontrado que la densidad de flotación de un DNA es función del contenido en pares citosina-guanina, según la ecuación de Rolfe y Meselson<>: d = 0,100 (G+C) + 1,658 donde d es la densidad y G+C es la fracción de guanina + citosina (en tanto por uno). ¿Sabría explicar la razón de esta dependencia?. Sabiendo que la densidad de flotación del T1 de E. Coli en cloruro de cesio es 1,7057, calcule su composición de bases.


14.- Dadas las siguientes velocidades de rotación, calcule la velocidad angular en las unidades apropiadas: a) 2400 rpm; b) 1000 rps.


15.- Un procedimiento de ultracentrifugación exige centrifugar 10 horas en un rotor determinado, con un campo centrífugo máximo (es decir, medido al fondo del turo) de 150.000 x g. Si el fondo del tubo está a 9,8 cm del eje, ¿qué velocidad se requiere?.