PROBLEMAS TEMA 1. 

1.- El colesterol libre y el esterificado pueden separarse mediante una cromatografía de adsorción en alúmina activada. Si se utilizan como eluyentes las mezclas de benceno/éter de petróleo (25/100) y etanol/benceno (1/100), ¿en qué fracción eluirán el colesterol libre y el esterificado?.

2.- Indíquese el orden decreciente de los Rf de los aminoácidos alanita, arginina, ácido aspártico y leucina en el sistema butanol/acético/agua, con un pH aproximado, en la fase acuosa, de 4,5 si en estas condiciones el reparto entre la fase orgánica apolar y la fase polar acuosa viene determinado por la naturaleza de la cadena.

3.- De los sistemas de disolvente utilizados en cromatografía en capa fina, butanol/acético/agua (80/20/20), hexano/éter/acético (70/30/1) y cloroformo/metanol/agua (65/25/4), dígase cuál sería el sistema más adecuado para separar aminoácidos, lípidos  neutros y fosfolípidos. Razónese la respuesta. 

4.- Los tiempos de retención y el área bajo los picos en una cromatografía de gases de ácidos orgánicos de cadena corta son:

                    Acido                                  Tiempo de retención (min)            Impulsos

                -------------------                        -----------------------------------         ----------------

                 Acético (2:0)                                  2,00                                          13.252

                 Propiónico (3:0)                             2,30                                            8.650

                 Butírico (4:0)                                 2,75                                          20.475

                 Valérico (5:0)                                3,30                                            4.630

Indíquese cuál sería el tiempo de retención del ácido caproico (6:0), calcúlese el porcentaje relativo de cada uno de los ácidos e indíquese la cantidad de cada uno de ellos si la mezcla contenía 20 µmoles de ácido acético.
5.- Indíquese el orden de elusión de los aminoácidos glicocola, aspártico, arginina, isoleucina, histidina y serina utilizando una resina cambiadora de cationes y eluyendo con tampones citrato 0,2 N y pH 3,3, 4,3 y 5,5. La mezcla se aplicó en la columna disuelta en un tampón citrato de pH 3,3.
6.- La determinación del peso molecular de la β-cetoadípico-enol-lactona hidrolasa de Acinetobacter calcoaceticus se llevó a cabo por una cromatografía de penetrabilidad. Los valores de Kav para una serie de proteínas patrón son:

 

                                        Proteína                                           Peso molecular                     Kav

                                    Piruvato quinasa                                     237.000                           0,156

                                    Alcohol deshidrogenasa                          160.000                           0,260

                                    Albúmina de suero                                    67.000                           0,440

                                    Ovoalbúmina                                             42.000                           0,550

                                    Lisozima                                                    14.000                          0,790

                                    Citocromo c                                               12.000                           0,840

            Determínese el peso molecular de la hidrolasa si su Kav es de 0,67.